Am 1. Juni 1850 wurde das letzte fehlende Stück der Südbahn, der Streckenabschnitt Biberach - Ulm, feierlich eingeweiht. Wenige Tage später, am 29. Juni 1850, konnte die Strecke Geislingen - Ulm der württembergischen Ostbahn in Betrieb genommen werden.
Damit war die erste durchgehende württembergischen Bahnverbindung vom Neckar in Heilbronn über Stuttgart und Ulm an den Bodensee vollendet. Es folgten weitere wichtige Strecken.
Die Eisenbahn wurde in den folgenden Jahren zu einem starken Motor für die Wirtschaft und Industrie in der lange Zeit abgehängten ehemals stolzen freien Reichsstadt. Sie prägt das Stadtbild auch heute noch.